运用植块法培养脑微血管内皮细胞
祝慧凤 万 东1 王建伟2 罗 勇1 徐晓玉*
西南大学药学院暨中医药学院, 重庆400716，1重庆医科大学附属第一医院神经内科, 重庆400016; 2重庆医科大学组胚教研室, 重庆400016
摘要 : 探讨简易可行的脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells， BMECs)培养方法， 为研究BMECs细胞在脑血管疾病中的重要作用提供技术支持。分离出生后1~7天内的SD乳鼠大脑皮质区， 植块法培养BMECs细胞。用倒置显微镜观察BMECs细胞的形态以及从皮质块迁出的过程; MTT 比色法检测BMECs细胞的生长曲线; 采用免疫组化染色检测VIII因子相关抗原和CD34抗原， 以鉴定内皮细胞。结果发现， 大脑皮质块植块法培养的大鼠BMECs细胞呈单层贴壁生长， 细胞形态以长梭形、多角形三角形、四边形为主， 呈典型的“铺路石”样征象， 经鉴定为内皮细胞， 第三代纯度达95%以上。提示该方法具有经济、简便、要求条件不高， 易于纯化的优点， 可作为大鼠BMECs细胞体外培养的良好模型。
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