miR-34c逆转乳腺癌耐药细胞株MCF-7/DOX耐药性的研究

摘要 : miR-34在肿瘤发生发展中起着至关重要的作用, 然而, miR-34在肿瘤耐药中的作用研究不多。该研究将合成的miR-34c成熟序列转染乳腺癌阿霉素(doxorubicin, DOX)耐药细胞MCF-7/DOX, 探讨miR-34c体外逆转MCF-7/DOX细胞耐药性作用及其可能的机制。采用Real-time RT-PCR检测miR-34c在乳腺癌耐药细胞株MCF-7/DOX中的表达, MTS法检测miR-34c对MCF-7/DOX细胞阿霉素耐药性的影响, 流式细胞术检测miR-34c对MCF-7/DOX细胞周期和凋亡的影响, Real-time RT-PCR和Western blot法检测多药耐药相关蛋白MDR、MRP以及细胞周期与凋亡相关蛋白Bcl-2、E2F3的表达。结果显示, miR-34c在乳腺癌MCF-7/DOX耐药细胞中低表达, 转染miR-34c可明显增加耐药细胞对阿霉素的敏感性; 流式分析发现, miR-34c可以促进耐药细胞G2期细胞周期阻滞和凋亡; 与对照组相比较, miR-34c转染组细胞MDR、MRP蛋白表达无明显变化, 而Bcl-2、E2F3 mRNA和蛋白表达均明显下调。研究表明, miR-34c直接靶向抑制Bcl-2和E2F3的表达, 诱导细胞周期G2期阻滞和凋亡, 进而增强MCF-7/DOX耐药细胞胞对阿霉素的敏感性。