NID1促进人卵巢癌细胞OVCAR-3侵袭转移及分子机制的研究

朱远远^1,2 张春冬^1,2 王义涛^1,2 王森^1,2 朱慧芳^1,2 李轶^1,2 雷云龙^1,2 卜友泉^1,2 张莹^1,2*

¹重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室, 重庆 400016;²重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心, 重庆 400016

摘要 : Nidogen-1(NID1)是新发现的一个候选卵巢癌诊断标志物, 该研究旨在初探其在卵巢癌细胞中的生物学功能。首先构建稳定过表达外源NID1的人卵巢癌细胞系OVCAR-3, 然后采用划痕实验和Transwell迁移和侵袭实验检测细胞的迁移侵袭能力, 并通过荧光定量PCR和Western blot检测细胞中上皮–间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)相关蛋白和ERK/MAPK通路蛋白的表达情况。结果显示, 与空载细胞相比, 稳定过表达NID1的OVCAR-3细胞其划痕愈合能力、细胞迁移和侵袭能力均明显增强。较之空载细胞的上皮细胞样外形, 稳定过表达NID1的OVCAR-3细胞呈间质细胞样外形, 其上皮细胞标志分子E-cadherin表达下调, 间质细胞标志分子(包括Vimentin和N-cadherin)和EMT相关转录因子Twist-2表达上调。此外, 稳定过表达NID1的OVCAR-3细胞中ERK1/2的磷酸化水平升高, 经ERK/MAPK通路的抑制剂U0126下调ERK1/2的磷酸化水平后其E-cadherin、Vimentin、N-cadherin和Twist-2表达水平出现逆转。这些结果提示, NID1可能通过激活ERK/MAPK通路促进卵巢癌细胞的EMT过程, 进而增强其侵袭转移的能力。