Caveolin-1 siRNA对与乳腺癌细胞共培养的成纤维细胞自噬体表达影响的研究

石小玉¹ 肖亮² 熊丽霞¹ 孟闯³ 齐观云³ 李文林^3*

¹南昌大学基础医学院, 南昌 330006; ²江西中医药大学中医院临床检验中心, 南昌 330006;³南昌大学江西省医学生物高技术重点实验室, 南昌 330006

摘要 : 为了探索乳腺癌相关的人成纤维细胞中窖蛋白-1(Caveolin-1, Cav-1)与自噬体的相关性及其对乳腺癌细胞的作用, 该研究采用siRNA技术干扰成纤维细胞株ESF表达Cav-1, qRTPCR和Western blot确定siRNA干扰Cav-1表达的效果; Transwell insert方法共培养乳腺癌细胞株BT474和ESF细胞, 单丹磺酰戊二胺(monodansylcadaverin, MDC)染色、激光共聚焦显微镜观察Cav-1 siRNA对自噬体表达的影响; qRT-PCR和Western blot检测Cav-1 siRNA对微管相关蛋白1轻链3II(microtubule-associated protein 1 light chain 3 II, LC3II)表达的影响; CCK-8方法检测BT474细胞的增殖和活力。结果显示, 靶向Cav-1的siRNA下调了ESF细胞中Cav-1的表达; Cav-1 siRNA促进ESF细胞自噬体和LC3II的表达, 转染了Cav-1 siRNA的ESF细胞与BT474细胞共培养对自噬体和LC3II的作用更为显著; BT474细胞在ESFsiCav-1(ESF cells transfected with Cav-1 siRNA)细胞共培养条件下增殖显著加快。研究表明, Cav-1 siRNA促进了与乳腺癌细胞共培养的成纤维细胞自噬体和LC3II的表达, 同时加快了与成纤维细胞共培养的乳腺癌细胞的增殖。