共载TFPI-2及顺铂磁性纳米复合物的制备及其对鼻咽癌的治疗

摘要 : 构建共载组织途径抑制因子-2(tissue factor pathway inhibitor-2, TFPI-2)及顺铂(cisplatin, CDDP)的磁性纳米(magnetic nanoparticles, MNP)复合物(MNP-CDDP/TFPI-2), 研究该复合物对鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma, NPC)的综合抑制效应。将前期制备的载CDDP磁性纳米颗粒(MNP-CDDP)和聚乙二醇单甲醚–聚乙烯亚胺(MPEG-PEI)TFPI-2静电吸附, 制备MNP-CDDP/TFPI-2, 通过红外光谱、透射电镜、激光粒度仪观察复合物的结构、粒径大小及电位, 邻苯二胺(o-phenylenediamine, OPDA)法检测复合物中CDDP含量。通过流式细胞仪检测基因转染效率, 分析磁性纳米复合物转染TFPI-2的情况; RT-PCR及Western blot法检测CNE-2细胞转染TFPI-2质粒后TFPI-2 mRNA和蛋白表达情况。采用CCK-8实验、流式细胞术及Matrigel侵袭实验检测MNPCDDP/TFPI-2对CNE-2细胞增殖、凋亡及细胞侵袭能力的影响。研究结果显示, 纳米复合物成功合成, 平均水动力学粒径151.2 nm, Zeta电位+14.5 mV, 复合物中CDDP含量平均为120 μg/mL, 包封率33.3%。复合物所载TFPI-2质粒转染率22.7%±2.5%。CNE-2转染TFPI-2质粒后, 胞内TFPI-2 mRNA和蛋白表达明显增加。MNP-CDDP/TFPI-2组细胞生长抑制率及凋亡率分别为34.8%和42.3%, 明显高于MNP-CDDP组(27.1%、38.0%)和(MPEG-PEI)TFPI-2组(18.9%、16.2%)(P<0.05)。Matrigel侵袭实验结果显示, 纳米复合药物组穿膜细胞数为28±3个, 明显低于对照组(P<0.05), 提示MNP-CDDP/TFPI-2组细胞侵袭和迁移能力降低。结果表明, 本研究已成功构建携带TFPI-2表达基因及CDDP的MNP-CDDP/TFPI-2; 体外实验显示, MNP-CDDP/TFPI-2对NPC细胞具有良好的综合抑制效应。