乳腺癌相关透明质酸变化对淋巴内皮细胞紧密连接分子ZO-1分布及细胞增殖的影响

摘要 : 该研究旨在探讨乳腺癌来源的透明质酸(hyaluronic acid, HA)分子大小变化对淋巴内皮细胞紧密连接分子ZO-1(zonula occludens-1)分布情况以及细胞增殖的影响。采用免疫组化实验检测8对良性乳腺疾病和乳腺癌患者组织HA的表达水平, 利用酶联免疫吸附实验检测20对正常人与乳腺癌患者血清中透明质酸分解酶(hyaluronidase, Hyase)含量; 通过免疫荧光法、荧光素钠渗透实验、MTT增殖实验和Western blot分别观察HA和寡分子透明质酸(oligosaccharides of Hyaluronicacid, oHA)作用淋巴内皮细胞后ZO-1分布、单层细胞渗透性、细胞增殖以及下游ROCK1/RhoA信号通路变化。结果表明, 与良性乳腺疾病对照组比较, 乳腺癌患者HA表达量明显增加(P<0.01); 与正常人相比, 乳腺癌患者血清Hyase水平显著升高(P<0.01), 提示乳腺癌发生时, HA升高伴随其降解酶增多, HA代谢活性增加。HA增强细胞间ZO-1的连接, 对ROCK1/RhoA蛋白表达水平无明显影响;相反, oHA促使淋巴内皮细胞ZO-1由胞膜向胞浆分布, 导致细胞连接呈褶皱状, 形成细胞间隙, 淋巴管渗透性增加, 上调ROCK1/RhoA蛋白表达水平, 促进淋巴内皮细胞增殖(P<0.01)。研究提示, oHA可能在乳腺癌淋巴管形态及增殖中发挥重要作用。