哺乳动物细胞杂交中降低聚乙二醇毒性的简易方法

摘要 : 聚乙二醇(PEG)对某些细胞系具有高度毒性。作者将两个仓鼠细胞的温度敏感突变株 AF8和 K12细胞接种于平皿内,在贴壁、伸展后,加入50%的 PEG 溶液诱导细胞融合。所用的 PEG 有二种:1.Baker PEG,2 Koch-Light PEG,分子量均为1000。PEG 作用30秒钟后冼去,加入生长培养液,置于温度敏感突变株的许可温度34℃下培养16～24小时,再移至非许可温度40.6℃下培养二周。其间每隔3—4天更液一次。上述部分材料在34℃培养后,以胰酶消化,用生长培养液1:20稀释居再接种于平皿内,于40.6℃培养.12～15天后染色,计算集落数。