人胚胎干细胞高效分化为巨核细胞模型的建立
高 洁1# 杨亦青1,2# 庞素蕾1 刘 鑫1 卢利莎3 雷晓华4 熊 涛3 王洪涛1 马 峰5 周家喜1*
1中国医学科学院, 北京协和医学院血液病医院(血液学研究所), 实验血液学国家重点实验室, 天津 300020;2河北北方学院医学检验学院, 张家口 075000;3长江大学生命科学学院, 荆州 434025;4中国科学院动物研究所,北京 10010
摘要 : 人胚胎干细胞具有无限增殖潜能, 且能够分化为包括巨核细胞在内的大多数的成熟血细胞。因此, 为解决临床治疗血小板来源不足而建立一种由人胚胎干细胞高效分化获得成熟巨核细胞的分化模型具有重要应用前景。该文利用人胚胎干细胞与mAGM-S3基质细胞系共培养进行早期造血前体细胞的定向分化, 并在分化第14 d获得大量“卵石样”造血前体细胞(CD43+细胞、CD45+细胞)。将“卵石样”造血前体细胞分离后, 用无血清培养基分阶段添加SCF、TPO、IL-6、IL-3、FLt-3、IL-11等细胞因子进行巨核细胞定向诱导分化。结果显示, 在分化的第3 d, CD41a+细胞比例可高达48.5%, CD42b+细胞比例可高达30.0%。对分化第6 d的细胞进行Wright-Giemsa染色,可见形态典型的巨核细胞。综上所述, 该研究初步建立了一种人胚胎干细胞高效分化为巨核细胞的模型, 为体外获得大量巨核细胞奠定了基础。
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