无血清原代培养大鼠海马神经元的形态与膜电位
张 明1 郭 艺 蒋 莉* 刘官信
重庆医科大学附属儿童医院神经内科, 重庆 400014
摘要 : 分离新生Wistar鼠海马， 采用添加B27的无血清培养液进行海马神经元原代培养， 动态观察海马神经元形态学变化; 通过免疫荧光细胞化学法检测神经纤丝(NF)的表达， 进行神经元鉴定及纯度计算; 采用电位敏感的荧光探针标记神经元， 在激光扫描共聚焦显微镜上动态监测去极化剂KCl作用前后膜电位的变化， 观察神经元电生理反应。结果表明: 此方法培养的大鼠海马神经元可在体外存活20天以上， 9～14 天为发育最成熟阶段， 培养7天神经元纯度达90%。KCl作用于细胞后胞内荧光强度增强， 细胞迅速去极化。本培养方法在体外获得高纯度的海马神经元并延长体外存活时间， 且显示出神经元的电生理反应特性。
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