人重组Fas配体体外诱导细胞周期特异性凋亡模型的建立及其意义

摘要 : 以Molt-4、Jurkat细胞株和外周血淋巴细胞(peripheral blood lymphocyte， PBL)为靶细胞， 检测细胞膜上Fas的表达。人重组Fas配体(recombinant human Fas ligand， rhFasL)诱导细胞6~36 h后用改良后的API等方法检测细胞凋亡及诱导凋亡过程中细胞周期蛋白的变化， 探讨Fas介导的细胞凋亡与细胞周期的关系。结果显示: rhFasL诱导Molt-4、Jurkat细胞株和植物血凝素刺激进入细胞周期的PBL的凋亡具有细胞周期特异性并始动于G₁期; 而G₀期PBL的细胞膜上虽然也有Fas的表达， 但不能诱导细胞凋亡。研究还发现rhFasL诱导细胞凋亡时G₁期的细胞周期蛋白D3明显升高， 细胞周期蛋白E明显下降。以上结果表明rhFasL体外诱导的细胞凋亡发生在晚G₁期， 细胞凋亡的发生与细胞是否通过限制点进入细胞周期有关， 细胞凋亡发生于晚G₁期是G₁期细胞周期蛋白E的下降和检测点的监督导致DNA受损的细胞不能通过G1/S交界的结果。