一种简单、快速、高效的基因定点突变方法
任彩萍， 刘卫东， 何志巍， 姚开泰
湖南医科大学肿瘤研究所 长沙 410078
摘要 : 小规模抽提含有编码小鼠补体Ⅱ型受体(mCR2)cDNA的质粒,体外合成两对寡核苷酸突变引物,利用PCR反应将突变引入mCR2cDNA中,即产生P15S和T68Y两种定点突变。然后用DpnI对消化PCR产物以去除模板DNA,取适量消化产物转化大肠杆菌XL1-Blue,随机挑选克隆进行测序筛选、鉴定所需突变株。结果表明这一新方法不仅操作简单、快速,而且突变率极高,几乎100％。 定点突变
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