P15INK4B高表达对人黑色素瘤细胞G1/S进程的阻滞及与MAPK信号相关性之初探

摘要 : 利用TdR-N_2O同步法分别获得P15高表达的MLIK6和表达空载体的MLC2的M期细胞和G_1期细胞,~3H-TdR掺入结果显示,与对照组细胞MLC2相比,实验组细胞MLIK6从G_1期进入S期时间延长2h,并且掺入强度明显减弱,DNA合成被抑制。进一步观察了P15INK4B对G_1/S相关调控蛋白的影响,在M期细胞释放8h(晚G_1期细胞)后,与对照组MLC2细胞相比,实验组MLIK6细胞中CyclinD1,CyclinE,Cdk4,C-Myc蛋白水平均降低。相反,P27~(KIP1)的表达却上升。同时探讨了MAPK信号在P15INK4B阻抑A375细胞G_1/S转换中的作用用与相关性，结果显示晚~期的MLIK6 细胞中ERKl ，ERK2 水平变化不大，而具有活性的P-ERKl 和P-E阻。均表现出下降。上述实验表明， P15 INK4B可能通过作用于G1 期相关的周期调节蛋白和抑制ERKl 和ERK2活性， 阻滞~/S转换与抑制DNA 合成。