重组人睾丸精子结合蛋白对人精子蛋白激酶A及蛋白激酶C活性的影响
宿文辉 王国丽 张 杰 金 博 冯 晨 张 哲 徐小燕 于秉治*
中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室, 沈阳110001
摘要 : 为探讨人睾丸精子结合蛋白(human testis sperm binding protein, hTSBP)促进人精子获能的分子机制, 检测了重组hTSBP对人精子蛋白激酶A(PKA)和蛋白激酶C(PKC)活性的影响。用重组载体pcDNA3.1/myc-His(-)B-tsbp转染真核细胞后, 金属亲和层析纯化表达的重组蛋白质His6-TSBP; 重组蛋白质处理健康成人精子后, 分别提取精子胞浆及胞膜蛋白组分, 发现重组蛋白质可以与精子胞膜结合; 经放射自显影检测, 发现0.1 mg/ml重组蛋白质可以提高人精子中PKA的活性, 对精子膜PKC活性无显著影响。