苹果液泡酸性转化酶基因片段的克隆及序列分析

摘要 : 在分析植物可溶性转化酶基因的保守区序列基础上 ,设计了一对PCR引物 ,以苹果(辽伏 )基因组DNA为模板 ,采用PCR方法扩增出长约 743bp的DNA片段 ,克隆入 pUCm T载体 ,测序结果表明 ,所获得的片段推测为苹果酸性转化酶基因的片段 ,该基因片段长度为 743bp ,是开放阅读框的一部分 ,无内含子。其序列已在GenBank中登记 (登记号为AF433644)。在Gen Bank中进行同源性检索 ,结果表明该成员编码的氨基酸与植物可溶性酸性转化酶的氨基酸同源性较高 ,与温州蜜柑 (GenBankAF0 1 4 92 5)、、胡萝卜 (X67163) 、甜菜(GenBank X81796) 和绿豆(GenBank
    DI0265) 液泡酸性转化酶基因编码蛋白质的氨基酸分别具有80% 、80% 、78 % 和77% 的同源
    性。而与定位于细胞壁的酸性转化酶(不溶性)同源性较低， 由此可推测出研究获得的苹果转化酶
    基因可能定于液泡。该基因片段的获得对于深入研究苹果展糖代谢以及果实发育和品质形成具有
    重要的意义。