烷化溶血磷脂对U266细胞作用的实验研究

摘要 : 为研究烷化溶血磷脂 (ET18OCH3)对骨髓瘤细胞系U266的体外杀伤作用。通过台盼蓝拒染法和克隆形成率来反映ET18OCH3对U266细胞的抗增殖效应 ;通过荧光显微镜、电镜观察细胞形态学变化 ,琼脂糖凝胶电泳观察DNA降解片段 ,流式细胞仪作DNA倍体分析来观察ET18OCH3诱导U2 66细胞凋亡的作用 ;通过RT PCR检测bcl2、cmyc mRNA水平 ,流式细胞仪检测Bcl2、Cmyc蛋白的表达来初步探讨其相关的作用机制。结果显示 ,U266细胞经ET18OCH3处理后细胞生长明显受抑 ,呈时间和剂量依赖性 ;荧光显微镜 ,电镜下观察均可见凋亡形态学改变， 7 .5μg/ml ET-18-OCH3 作用24 小时后出现典型的DNA 降解片段。流式细胞仪检测凋亡率为17.53% jRT-PCR 显示bcl-2 、c-myc mRNA 表达均l哇ET-18-OCH3 作用时间的增加而减弱，ET-18-0CH3 作用24 小时后， cl-2 、c-myc mRNA 分别减少了86% 、72%; 流式细胞仪检测Bcl-2 蛋白、巳myc 蛋白分别减少了原来的17% 、60% 。研究结果表明， ET-1 8-OCH3 对U266 细胞的生长具有明显的抑制作用，并可诱导细胞的凋亡，具有明显的抗肿瘤效应。