朵丽蝶兰二氢黄酮醇4-还原酶基因DtpsDFR的克隆与表达分析
钟淮钦1,2,3 黄敏玲1,2,3* 吴建设1,2,3 樊荣辉1,2,3 林 兵1,2,3
1福建省农业科学院作物研究所, 福州 350013; 2福建省农业科学院花卉研究中心, 福州 350013; 3福建省特色花卉工程技术研究中心, 福州 350013
摘要 : 二氢黄酮醇4-还原酶(dihydroflavonol 4-reduetase, DFR)是花色素苷合成途径中的一个关键酶。该研究利用RT-PCR和RACE技术从朵丽蝶兰‘满天红’深红色花瓣中克隆获得一个DFR基因, 命名为DtpsDFR。该cDNA序列全长1 286 bp, 编码378个氨基酸。氨基酸序列分析表明, Dtps-DFR编码的蛋白与Bromheadia finlaysoniana、文心兰、大花蕙兰、石斛兰等兰科植物的DFR蛋白同源性均在76%以上, 含有1个FR_SDR_e特征结构域, 存在NADPH结合基序和底物特异性结合基序, 属于NADB_Rossmann超家族; 系统进化树显示, DtpsDFR与Bromheadia finlaysoniana的DFR蛋白亲缘关系最近。实时荧光定量PCR分析结果显示, DtpsDFR基因的表达量随着花的发育逐渐降低,凋谢期微量表达; 在花瓣、萼片中的表达量高于唇瓣, 在叶片和根中微量表达。
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