用BRL-3A条件培养基培养鸡胚胎干细胞的初步研究

孟春花　张传生¹　杨娜娜²　王子玉 ³　曹少先　杜立新^4*

江苏省农业科学院畜牧研究所, 南京210014; ¹河北科技师范学院动物科学系, 昌黎066600;²泰山医学院生命科学研究所, 泰安271000; ³南京农业大学动物科技学院, 南京210095;
⁴中国农业科学院北京畜牧兽医研究所, 北京100094

摘要 : 以CEF细胞、MEF细胞和STO细胞为饲养层，用BRL-3A条件培养基培养寿光鸡Ⅹ期胚盘细胞，并对获得的细胞克隆进行了鉴定，证明其具有ES细胞的克隆形态、PAS染色阳性、AKP染色阳性、能分化为多种类型的细胞、能参与受体胚胎的发育并形成羽色嵌合体。实验结果表明: BRL-3A条件培养基能促进鸡ES细胞克隆的形成，用饲养层比不用饲养层更有利于克隆的形成，且STO细胞和MEF细胞饲养层的培养效果要好于CEF细胞饲养层( P<0.05); 挑克隆传代法比全消化法更有利于克隆的形成和未分化状态的维持( P<0.05)。