蒙脱石对大肠杆菌K₈₈感染Caco-2 细胞的屏障功能和紧密连接蛋白表达的影响

摘要 : 采用Caco-2细胞培养模型， 分析大肠杆菌K₈₈感染Caco-2后的单层细胞跨膜电阻值(TEER)、甘露醇透过率、紧密连接蛋白occludin分布的变化， 并在培养液中加入蒙脱石， 探讨蒙脱石对大肠杆菌K₈₈感染Caco-2后的屏障功能和紧密连接蛋白表达的影响。结果表明: 大肠杆菌K₈₈感染Caco-2细胞后， 细胞单层TEER值随时间的延长而降低， 感染3 h 后TEER值显著低于正常组(P<0.05)， 而添加蒙脱石组TEER值与正常组无显著差异(P>0.05)。蒙脱石剂量在0~1 g/L的范围内， 感染Caco-2细胞单层TEER值随着蒙脱石剂量的增加而急剧增加; 蒙脱石剂量在1~1.67 g/L的范围内， TEER值变化趋平。感染Caco-2细胞的³H甘露醇表观渗透系数随着时间的延长而增加， 各个时间点均显著高于正常组(P<0.05)， 而蒙脱石组各时间点³H甘露醇表观渗透系数均显著低于大肠杆菌K88感染组(P<0.05)。大肠杆菌K₈₈感染后， 相邻Caco-2细胞间紧密连接结构遭到破坏， occludin的表达减少， 而蒙脱石处理后可使大肠杆菌K₈₈引起的紧密连接结构受损减轻、occludin表达增多。结果提示蒙脱石可有效抑制大肠杆菌K₈₈黏附Caco-2细胞引起的通透性增加、屏障功能损坏， 改善紧密连接的结构和occludin的表达分布。