肝癌肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)体外扩增及特性研究

摘要 : 探讨从原发性肝癌(hepatocellular carcinoma, HCC)患者的术后肿瘤组织中分离肿瘤浸润性淋巴细胞(tumor-infiltrating lymphocyte, TIL), 并进行体外大量扩增的方法。在该研究工作中, 组织标本来源于术后的肿瘤癌旁组织, 经过组织破碎、酶消化后, 采用不连续密度梯度离心分离其中淋巴细胞。分离的淋巴细胞先采用大剂量重组人白介素2(IL-2)(2 000 U/mL)进行引发, 然后采用同种异体的外周血单核细胞作为饲养细胞进行扩增。针对9例原发性肝癌术后标本, 所分离的TIL均能成功进行培养扩增, 扩增后细胞数为(1~5.5)×109。扩增倍数为111~572。扩增后的TIL, 表型检测发现CD3+细胞的比例为(90.3±9.4)%, CD3+CD4+细胞的比例为(24.9±14.1)%, CD3+CD8+细胞的比例为(56.4±20.2)%, CD3+CD56+细胞的比例为(14.8±12.6)%。杀伤检测结果显示, 肝癌TIL对非自体肿瘤细胞系HepG2和Bel-7402有较强的杀伤作用。因此, 采用该改良的方法, 原发性肝癌的TIL在体外可以成功进行培养扩增, 并具有较强抗肿瘤活性, 可以作为肝癌术后巩固性免疫治疗的一种手段。