鲫鱼PKR-like Zα与d(GC)₁₃质粒的结合及其适应性进化

摘要 : Zα是一类能特异性识别与结合左旋DNA (Z-DNA)的蛋白质结构域， 分布于不同物种的多种蛋白质中， 其结构保守并分化自一个共同的祖先Z-结构域。适应性进化分析显示Zα没有经历正达尔文选择， 表明与其结构对应Zα的功能相当保守。凝胶阻滞试验表明原核表达的鲫鱼 PKR-like Zα多肽(CaPZα)不与pMD18-T质粒结合， 而却能与包含d(GC)₁₃的重组质粒pMD18-T/(GC)₁₃结合。同时， 与ADAR1 Zα相比， CaPZα与d(GC)₁₃质粒的结合能力较弱， 即CaPZα1和CaPZα2子域单独不能结合d(GC)₁₃质粒。这表明Zα功能虽然没有异化，但有很大的不同。实验结果还表明负超螺旋和d(GC)_n可能都是正常生理条件下，DNA形成潜在Z-DNA必不可少的因素。定点突变试验证实38N与60W两个氨基酸位点对于CaPZα结合Z-DNA非常关键。