Lipoxin A4通过调节肿瘤相关巨噬细胞对肝癌细胞株HepG2 microRNA表达谱的影响
黄婉秋1# 马明洋2# 程 雪3 王褚琳3 苗 烁3 吴 萍3*
1华中科技大学基础医学院2010级临床医学八年制, 武汉 430030; 2华中科技大学附属同济医院肝脏外科,武汉 430030; 3华中科技大学同济医学院基础医学院病理生理学系, 武汉 430030
摘要 : 肿瘤与炎症密切相关, 作者以往已证实内源性促炎症缓解介质脂氧素A4(Lipoxin A4,LXA4)能在整体和细胞水平发挥抗肝癌细胞增殖和转移的作用。为进一步探讨LXA4通过调节肿瘤相关巨噬细胞对肝癌细胞株HepG2 microRNAs(miRNAs)表达谱的影响, 该文首先提取经脂多糖(LPS)或LPS+LXA4作用24 h的人巨噬细胞株U937培养上清液, 分别称为ACM或LCM, 以模拟肿瘤的炎症微环境, 并用此上清液刺激HepG2细胞, 24 h后提取细胞总RNA, 采用microRNA芯片miRCURYTMLNA Array(V16.0)检测, 计算各样本中的miRNAs标准值及比值。以两组间Hy3荧光标记信号强度的比值≤0.5或≥2为标准判定差异表达miRNA。Real-time PCR检测hsa-miR-623的相对含量以验证基因芯片的结果。结果发现, 与对照组细胞相比, 经过ACM作用24 h的HepG2细胞有35个miRNAs上调、130个miRNAs下调。LCM组与ACM组相比, HepG2细胞有185个miRNAs上调、71个miRNAs下调。 Real-time PCR检测的结果证实, hsa-miR-623的变化与基因芯片趋势一致。综上所述, LXA4能通过肿瘤相关巨噬细胞而间接发挥其调节HepG2细胞miRNAs表达谱的作用。
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