LATS1过表达对肺癌A549细胞增殖及周期的影响
熊 伟 吴庆琛* 张 诚
重庆医科大学附属第一医院胸心外科, 重庆 400016
摘要 : 通过过表达手段上调大肿瘤抑制因子1(large tumor suppressor gene 1, LATS1)基因在
A549细胞中的表达, 研究LATS1对A549细胞生长和细胞周期调控的作用。构建过表达LATS1基因的慢病毒载体, 转染A549细胞株, 采用RT-PCR和蛋白质印迹法检测转染后A549细胞中LATS1、YAP mRNA和蛋白的表达效率; 流式细胞术检测细胞凋亡、周期情况; CCK-8检测细胞的增殖水平变化。结果发现, 过表达LATS1慢病毒载体转染A549细胞株后, LATS1 mRNA及蛋白表达水平高于未处理组及转染空载体组, YAP mRNA及蛋白表达水平低于未处理组及转染空载体组; 过表达LATS1慢病毒转染后, A549细胞增殖率从第五天开始低于对照组(P<0.05), 过表达组细胞G1期比例明显增高(P<0.05), 凋亡率明显增加(P<0.05), 差异均有统计学意义。以上结果提示, LATS1可通过下调YAP的表达水平促进A549细胞的凋亡, 诱导G1期阻滞, 降低细胞的增殖能力。
A549细胞中的表达, 研究LATS1对A549细胞生长和细胞周期调控的作用。构建过表达LATS1基因的慢病毒载体, 转染A549细胞株, 采用RT-PCR和蛋白质印迹法检测转染后A549细胞中LATS1、YAP mRNA和蛋白的表达效率; 流式细胞术检测细胞凋亡、周期情况; CCK-8检测细胞的增殖水平变化。结果发现, 过表达LATS1慢病毒载体转染A549细胞株后, LATS1 mRNA及蛋白表达水平高于未处理组及转染空载体组, YAP mRNA及蛋白表达水平低于未处理组及转染空载体组; 过表达LATS1慢病毒转染后, A549细胞增殖率从第五天开始低于对照组(P<0.05), 过表达组细胞G1期比例明显增高(P<0.05), 凋亡率明显增加(P<0.05), 差异均有统计学意义。以上结果提示, LATS1可通过下调YAP的表达水平促进A549细胞的凋亡, 诱导G1期阻滞, 降低细胞的增殖能力。
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