全反式维甲酸协同DAPT抑制胶质瘤干细胞的自我更新

摘要 : 前期研究脑表明, 脑胶质瘤干细胞(glioma stem cells, GSCs)是胶质瘤发生和发展的重要因素, 探索靶向干预GSCs生长有可能成为脑胶质瘤治疗的有效途径之一。该研究旨在阐明两种药物ATRA和γ-分泌酶抑制剂DAPT协同抑制GSCs自我更新的生物学效应。通过用台盼蓝排染法、克隆球形成试验和免疫印迹分析了两种药物的单独使用或联用对GSC样细胞PGC1和PGC2生长、成球能力和自我更新以及干细胞标志物表达的影响。结果发现, 单独使用ATRA对PGC1生长有一定的抑制作用, 而对PGC2生长几乎没有影响; DAPT对PGCs的生长抑制作用明显强于ATRA。高浓度ATRA(80 μmol/L)能诱导PGCs的分化, 降低PGCs成球大小, 且成球效率降至5%~8%, 而正常对照组为32%~35%; 同样, DAPT(40 μmol/L)也能降低PGCs成球大小, 且成球效率降至2%~3%; 低浓度ATRA(20 μmol/L)和DAPT(5 μmol/L)对PGCs自我更新能力和干性没有明显影响, 而联合使用后其明显降低PGCs的成球大小, 且成球效率降至3%~5%, 促进细胞凋亡, 并且明显抑制了干细胞标志物Nestin、CD133、Sox2、Oct4的表达, 提高了分化标志物GFAP的表达。该研究证明了低浓度的ATRA和DAPT能协同抑制脑胶质瘤干细胞PGCs的自我更新。研究结果将为脑胶质瘤的临床研究提供实验依据。