阳离子脂质体介导基因转染肿瘤细胞

赵轶男^1,2 张树彪^1* 崔韶晖¹ 张传敏¹ 张淑芬²

¹大连民族学院生物技术与资源利用国家民委–教育部重点实验室, 大连 116600;
²大连理工大学精细化工国家重点实验室, 大连 116012

摘要 : 使用基因转运载体运载肿瘤细胞进行转染是基因治疗的关键环节之一。Lipofectamine2000和DOTAP作为商品转染试剂, 具有较高的转染效率。为了进一步发掘其作为基因转运载体的应用潜力, 该文研究了Lipofectamine 2000和DOTAP的粒径、Zeta电位及形态, 并分别与绿色荧光蛋白基因(pGFP-N2)、荧光素酶基因(pGL3)结合, 形成脂质体/DNA复合物, 通过载入人喉癌细胞(Hep-2)和人肺癌细胞(NCI-H460), 考察了其转染效率和细胞毒性。结果表明, 脂质体Lipofectamine 2000与DOTAP都能有效压缩DNA, 形成复合物。Lipofectamine 2000与DOTAP相比,转染效率高, 与DNA最佳转染比例范围为2:1~4:1。毒性实验显示, 在N/P大于3/1时, Lipofectamine2000与DOTAP对癌细胞具有一定的细胞毒性。细胞种类对脂质体的转染效率有很大影响, Lipofectamine2000对Hep-2细胞的转染效率比NCI-H460高。