人siALK2重组腺病毒的构建及其对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、迁移和侵袭的影响

摘要 : 用前期设计并合成好的重组腺病毒质粒pAdsiALK2, 经Pac I酶切后转染至HEK293细胞进行包装, 制备重组腺病毒, 扩增后进行病毒滴度测定, 以重组腺病毒siALK2(AdsiALK2)感染MDA-MB-231细胞, 以含RFP的腺病毒作为感染对照, 并设空白对照组。通过RT-PCR验证MDAMB-231细胞中ALK2表达显著下降; MTT法、平板集落形成试验、细胞划痕试验及Transwell侵袭试验证实MDA-MB-231/siALK2组相比MDA-MB-231/RFP组细胞的增殖活力、集落形成率及划痕愈合率均显著降低(P<0.05), 穿膜细胞数也明显减少(P<0.05), 而MDA-MB-231/RFP组与空白对照组比较, 差异无统计学意义(P>0.05)。该研究表明, 下调ALK2表达后可以在体外抑制乳腺癌MDAMB-231细胞的增殖、迁移与侵袭。