脂蛋白脂酶缺失症基因治疗载体的构建及功能验证

王恺龙¹ 郑李彬¹ 张帆¹ 沈良才¹ Libby Andrew² 李旭丽³ 张瑾^1*

¹河北科技师范学院生命科技学院, 秦皇岛 066004; ²Division of Endocrinology, University of Colorado, Colorado 80045, USA; ³秦皇岛市第三医院, 秦皇岛 066000

摘要 : 脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase, LPL)是甘油三酯分解的限速酶, LPL基因缺失会引起高血脂症, 虽然发病率低, 但到目前为止, 尚无有效治疗手段。该文构建了用于纠正LPL缺失基因型的逆转录病毒载体MSCV-hLPL, 结果表明, MSCV-hLPL可以高效侵染体外培养的细胞系C2C12、HEK293和3T3-L1, 并且都可以产生具有活性的脂蛋白脂酶。利用MSCV-hLPL侵染后的C2C12、HEK293和3T3-L1, 分别注射到裸鼠皮下组织, 发现C2C12和3T3-L1可以分泌脂蛋白脂酶到临近的肌肉组织中, 显著提高LPL活性。以上工作证明, 基因治疗载体可以纠正脂蛋白脂酶缺失的基因型, 而脂肪细胞和肌肉细胞移植入裸鼠体内后, 均可以作为生物反应器产生具有活性的LPL。这是该领域中的一次开拓性尝试, 为脂蛋白脂酶缺失症治疗方法的开发打下了坚实的基础。