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早期反应基因Egr-1参与高糖诱导β细胞凋亡的初步研究


李 聪1 姜 珊2 沈 宁2 高基民1* 李朝军2*
1温州医学院检验与生命科学院, 温州 325035; 2南京大学模式动物研究所, 南京 210093
摘要 : 糖尿病是一种慢性代谢性疾病, 胰岛β细胞功能损伤或数量减少都会导致其发生。该研究主要探讨早期反应基因-1(early growth responsive gene-1, Egr-1)参与高糖诱导β细胞凋亡的过程。利用永生化NIT-1胰岛β细胞株为实验模型, 分成正常对照组和高糖组; 通过MTT、DAPI染色和DNA Ladder以及流式细胞术等手段检测持续性高糖刺激对细胞活力和凋亡的影响; 采用Real-time PCR和Western blot法检测Egr-1转录和蛋白表达水平; 竞争性抑制Egr-1活性后检测细胞活力和凋亡的变化。研究发现, 与对照组相比持续性高糖刺激后细胞活力下降, 凋亡明显增加(48 h, P<0.05; 72 h, P<0.01); Egr-1转录和蛋白表达水平均显著上调(P<0.01), 抑制其表达活性可以明显改善细胞活力和降低凋亡水平(48 h, P<0.05)。提示Egr-1的确参与到高糖诱导β细胞凋亡的过程中。