p38 MAPK信号通路在BMP-2诱导人牙囊细胞成骨分化中的作用

陈学鹏^1*1 叶青松² 蔡霞³ 张天厚^4*

¹ 浙江大学医学院附属口腔医院正畸科, 杭州 310006; ² 詹姆斯库克大学牙学院正畸科, 凯恩斯 4870, 澳大利亚;3浙江大学医学院附属口腔医院牙周科, 杭州 310006; 4浙江大学医学院附属第二医院口腔科, 杭州 310009

摘要 : 该文主要探讨p38 MAPK信号通路在人骨形态发生蛋白-2(BMP-2)诱导人牙囊细胞成骨分化中的作用。从人成骨肉瘤细胞株MG-63中克隆hBMP-2基因, 通过基因重组技术构建pcDNA3.1(+)-hBMP-2真核表达质粒, 采用脂质体法转染人牙囊细胞, 以G418筛选得到能够稳定表达BMP-2的细胞克隆。Quantitative Real-time RT-PCR及Western blot检测BMP-2目的基因和蛋白的表达。以p38 MAPK特异性抑制剂SB203580作用于稳定表达BMP-2的人牙囊细胞, 观察MAPKAP激酶-2磷酸化蛋白、碱性磷酸酶活性及成骨相关基因表达水平变化。结果显示, 通过基因重组和基因转染获得能够稳定表达BMP-2的人牙囊细胞。SB203580明显降低MAPKAP激酶-2磷酸化蛋白的表达水平。BMP-2水平持续高表达能诱导人牙囊细胞碱性磷酸酶活性升高, 同时增强OSX、Runx2、OCN、BSP及OPN等成骨相关基因的表达水平, 但BMP-2诱导人牙囊细胞成骨分化的作用被SB203580抑制。这表明, p38 MAPK信号通路在BMP-2诱导人牙囊细胞成骨分化中发挥调控作用。