人Ska2/FAM33A核心启动子区域的初步鉴定与分析
艾 青1,2 翁华莉1,2 张 莹1,2 刘 竹1,2 王义涛1,2 李 轶1,2朱慧芳1,2 张春冬1,2* 卜友泉1,2*
1重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室, 重庆 400016; 2重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心, 重庆 400016
摘要 : Ska2(spindle and KT associated 2), 也称FAM33A(family with sequence similarity 33, member A), 是新近发现的一个与细胞周期调控和肿瘤发生发展均密切相关的新基因, 但其表达调控机制仍不清楚。该研究是在此前对Ska2基因启动子鉴定分析的基础上, 进一步对Ska2基因的核心启动子区域进行初步鉴定和分析。采用PCR技术, 构建5个Ska2基因启动子的系列删除体, 并对Ska2核心启动子区中的2个潜在NF-Y结合位点进行单独或联合定点突变, 构建3个定点突变重组体, 采用荧光素酶双报告基因分析技术检测各重组体的启动子活性。启动子活性分析结果表明, 所构建删除体均具有较强启动子活性; 2个潜在NF-Y结合位点单独或联合定点突变均可导致Ska2启动子活性的降低; 共转染NF-Y表达质粒后, Ska2的启动子活性明显提高。该研究结果不仅将Ska2的核心启动子区域定位于一个80 bp的范围内, 并且也提示NF-Y是一个调节Ska2转录的重要转录因子。
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