褐藻多糖硫酸酯诱导肝癌细胞凋亡中氧化应激作用

摘要 : 探讨褐藻多糖硫酸酯(Fucoidan)在诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡中氧化应激的作用。采用MTT法检测细胞活性; 透射电镜观察细胞超微结构的变化; 采用流式细胞仪检测细胞凋亡率(AnnexinV/PI法); 采用分光光度法测定细胞内丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)的含量以及超氧化物歧化酶(SOD)的活性; 蛋白印迹法检测细胞中Bcl-2、Bax表达含量的变化。结果显示, Fucoidan抑制SMMC-7721细胞生长, 细胞表面连接减少, 染色质凝集, 细胞核固缩, 线粒体肿胀及数目减少, 呈现典型的凋亡形态; Fucoidan(1 000 μg/mL)作用48 h后, 细胞凋亡率达到40.7%; 细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性降低(P<0.05), GSH含量显著降低(P<0.01), MDA含量显著增加(P<0.01); 细胞中Bcl-2蛋白减少, 而Bax蛋白水平呈增加趋势。提示Fucoidan诱导SMMC-7721细胞凋亡, 可能与细胞中还原型GSH耗竭, ROS过度积累致线粒体损伤, 从而启动内源性凋亡途径有关。