RASSF1A逆转A549-DDP细胞对顺铂耐受的实验研究

摘要 : RASSF1A表达下降可能是肺癌对顺铂获得性耐药的主要因素之一。为了寻找预测顺铂对肺腺癌A549细胞化疗敏感性的生物标志, 该研究以对顺铂耐药的同源A549细胞(A549-DDP)为研究对象, 利用转染技术上调RASSF1A表达。RT-PCR和Western blot检测转染前后RASSF1A在mRNA和蛋白水平的表达情况。在不同浓度顺铂作用下, 通过MTT法、克隆形成实验检测转染前后细胞活力并计算IC50和计数克隆形成数。在同一浓度顺铂作用下, 流式细胞仪检测转染前后细胞凋亡分数的改变。结果显示: 顺铂作用24 h后, 转染RASSF1A表达质粒的A549-DDP细胞对顺铂IC50明显低于A549-DDP细胞[(39.9±6.3) μmol/L vs (53.0±5.8) μmol/L, P=0.036]; 不同浓度顺铂连续作用5天后, 转染RASSF1A表达质粒的A549-DDP细胞形成的克隆数明显少于A549-DDP细胞组; 在同一浓度顺铂作用下, 转染RASSF1A表达质粒的A549-DDP凋亡分数明显大于A549-DDP细胞[(7.10±0.01)% vs (3.80±0.18)%,P=0.002]。结果提示, RASSF1A表达下降可能是肺腺癌A549细胞对顺铂获得性耐药的重要因素之一,RASSF1A表达在临床上作为肺癌患者顺铂化疗耐受的生物标志值得进一步研究。