不同年龄大鼠血清对骨髓间充质干细胞衰老影响的实验研究

摘要 : 制备成年(8~12周龄)和老年(64~72周龄) SD大鼠血清， 实验随机分为两组: 年轻血清 组和老年血清组， 分别采用成年和老年SD大鼠血清培养成年MSCs 36小时后， 衰老相关β-半乳糖苷 酶和活性氧染色观察细胞衰老， MTT法检测细胞增殖， AO/EB法和Hoechst 33342染色法观察细胞 凋亡及存活情况。免疫细胞化学和Western blot法检测衰老相关蛋白γ-H2A.X、p53表达， RT-PCR法 观察p53、p21 mRNA表达。结果发现， 与年轻血清组相比， 老年血清组MSCs衰老细胞数明显增加 ((96.2±24.1)/500细胞vs (30.8±8.2)/500细胞， P<0.01)、增殖能力减弱， 凋亡率升高， γ-H2A.X、p53蛋 白表达水平升高， p53、p21 mRNA表达升高。这些结果说明、老年SD大鼠血清可促进MSCs发生 衰老变化， 并抑制MSCs增殖及存活能力， 这一作用可能与DNA损伤反应和p53/p21信号通路有关。