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重组人S100A6促进人乳腺癌细胞MCF-7的增殖和迁移侵袭并抑制其凋亡


游 莉 徐兰兰 郭元元 孙双双 邹正渝 黎玉叶 罗进勇 何通川 周 兰*
重庆医科大学医学检验系临床检验诊断学教育部重点实验室, 重庆 400016
摘要 : 该研究旨在探讨重组人S100A6蛋白对乳腺癌细胞株MCF-7的增殖、凋亡、迁移及侵袭能力的影响。利用原核表达制备重组人S100A6蛋白(GST-hS100A6), SDS-PAGE显示其大小为36 kDa, Western blot显示其可以被S100A6抗体特异识别, BCA法测定1 L菌液共收获约16.7 mg蛋白; 将其作用于人乳腺癌细胞MCF-7, MTT显示细胞培养48 h时, 浓度为100 μg/mL和300 μg/mL的GST-hS100A6组的D492值较GST组增加29.1%和84.6%(P<0.05), 提示S100A6促进MCF-7细胞增殖; 平板克隆形成实验显示GST-hS100A6组的克隆形成率较GST组高38.7%(P<0.05), 提示S100A6促进MCF-7的克隆形成; Hoechst染色显示GST-hS100A6组在24 h时细胞凋亡率较GST组减少67.8%(P<0.05), 48 h时细胞凋亡率较GST组减少58.4%(P<0.05), 提示S100A6抑制MCF-7细胞凋亡;划痕实验显示在24 h时GST-hS100A6组的划痕愈合率为GST组的2.2倍(P<0.05), 提示S100A6促进MCF-7细胞迁移; Transwell显示GST-hS100A6组在24 h时穿膜细胞数较GST组增加88.1%(P<0.05),提示S100A6促进MCF-7细胞侵袭。以上结果显示S100A6对人乳腺癌具有一定的促进作用, 有可能成为乳腺癌分子诊断的标志物和治疗的新靶标。