人ACER2基因启动子的鉴定与初步分析
刘 竹1,2 艾 青1,2 兰 欢1,2 吉 颖1,2 杨正梅2 何江宜2 郝晓璐2 宋方洲1,2 卜友泉1,2*
1重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室, 重庆 400016;2重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心, 重庆 400016
摘要 : 碱性神经酰胺酶2(alkaline ceramidase 2， ACER2)是一个参与脂质类信号分子神经酰胺代谢的酶分子， 在细胞增殖、衰老和凋亡等过程中起重要作用。为了进一步研究ACER2基因的转录调控机制， 该研究克隆鉴定了ACER2基因的启动子。首先， 应用5'RACE(rapid amplification of cDNA ends， cDNA末端快速扩增)技术鉴定了ACER2基因的转录起始位点。然后， 通过PCR定向克隆和定点突变策略， 构建了三个长度不同的覆盖ACER2基因5'端侧翼区起始密码子ATG上游约1.3Kb区域的一系列ACER2基因启动子荧光素酶报告基因重组体。启动子活性分析表明， ACER2基因启动子定位于转录起始位点附近约670 bp的区域内。转录因子结合位点分析结果表明， ACER2基因启动子含有Sp1、GATA-1和AP-1等潜在的转录因子结合位点， 提示Sp1和GATA-1等转录因子可能参与ACER2基因的转录调控。
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