靶向干扰Chkl增强阿霉素抗人乳腺癌MCF-7/adr细胞的作用机制研究

摘要 : Chkl的高表达可能是肿瘤对化疗药物的敏感性降低的重要因素之一， 本研究的目的是观察siRNA干扰Chk1对人乳腺癌耐药细胞株MCF-7/adr(耐阿霉素)生长及细胞周期的影响， 探讨Chk1在乳腺癌细胞耐药中的作用机制。采用RNAi技术抑制MCF-7/adr细胞中Chk1的表达。Westernblot检测转染前后细胞内Chk1蛋白表达情况， 经阿霉素作用后， 流式细胞术(FCM)检测其细胞周期分布及细胞凋亡率， MTT法检测细胞增殖。Western blot结果显示， Chk1 siRNA转染24 h后，MCF-7/adr细胞中Chk1蛋白表达下降了67%， 明显低于对照组和空载体转染组(P<0.05)。FCM法检测结果显示， 同时， 抑制Chk1的表达可解除阿霉素引起的G2/M期阻滞; 使阿霉素诱导的细胞凋亡率由转染前的(5.54±0.15)%上升到(22.24±0.13)% (P<0.05); 在阿霉素浓度为0.4 mg/L、4 mg/L时， 细胞的增殖活性分别下降13%、34%。提示siRNA干扰Chk1能够通过调控MCF-7/adr细胞周期及增殖从而增强乳腺癌细胞对阿霉素的敏感性， 为临床上克服乳腺癌化疗耐药提供了新的作用靶点。