未分化和分化足细胞生物学性状及相关结构蛋白表达的变化

摘要 : 体外33 ℃许可条件下培养由H-2Kb-tsA58转基因小鼠所建立的未分化足细胞系， 并在37 ℃非许可条件下诱导其分化。观察足细胞分化后形态学改变; MTT法测定细胞的生长曲线; 红色荧光染料PKH-26标记足细胞， 追踪其在子代细胞中的分布， 检测细胞增殖能力; 流式细胞仪检测细胞周期的改变; Western印迹检测足细胞相关蛋白CD2AP、α-actinin和足细胞分化相关蛋白nephrin的表达; 免疫荧光结合激光共聚焦方法检测CD2AP、nephrin、α-actinin、F-肌动蛋白和微管蛋白的表达变化。结果显示: 与未分化足细胞相比， 分化足细胞形态发生改变， 生长速度减慢， 增殖能力下降; 细胞周期表现为G₀/G₁期细胞比例的增多和S期及G₂/M期的细胞比例下降; CD2AP、nephrin和α-actinin的表达明显增高; CD2AP、nephrin、α-actinin、F-肌动蛋白和微管蛋白在表达分布上均发生明显的改变。以上结果表明， 足细胞分化后生物学性状明显发生改变， 细胞骨架重新分布; CD2AP、nephrin、α-actinin、F-肌动蛋白和微管蛋白均在足细胞的分化过程中发挥重要作用。