Napsin A 基因对A549 细胞在上皮- 间质转化中增殖的影响及其机制
管淑红1 郑金旭2* 许 清2 汤 艳2 刘继柱2 吕晓婷2
1 江苏大学基础医学与医学技术学院, 镇江 212013; 2 江苏大学附属医院呼吸科, 镇江 212001
摘要 : 采用慢病毒载体质粒PLJM1将Napsin A基因转染到人肺腺癌细胞——A549细胞中，获得稳定表达Napsin A 蛋白的特性并鉴定， 通过转化生长因子-β1 刺激A549 细胞发生上皮- 间质转化， 体外构建上皮- 间质转化模型并鉴定。MTT法检测转基因前后A549 细胞在上皮- 间质转化过程中生长速率的变化; 流式细胞术检测其细胞周期的改变， 最后予Western blot 检测黏着斑激酶的表达情况， 探讨Napsin A 基因对A549 细胞在上皮- 间质转化过程中增殖的影响及其机制。结果表明转染后的A549 细胞表达Napsin A 蛋白明显增加(P<0.01); A549 细胞发生上皮- 间质转化后细胞E 钙蛋白表达下调(P<0.01)， Ⅰ型胶原表达上调(P<0.01); 转基因细胞在体外上皮- 间质转化模型中增殖速度减慢(P<0.05)， 且细胞周期被阻滞在G1 期(P<0.01)， 其表达整合素信号传导通路的基础分子——黏着斑激酶的量显著下降(P<0.01)。提示Napsin A 基因可以抑制A549 细胞在上皮-间质转化过程中的进一步增殖， 其机制可能与抑制整合素信号传导通路有关。
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