CMV 早期转录增强子对人癌胚抗原启动子效率的作用研究

陈琼姜¹　贾振宇^1*　陈　萍²　魏　群²　张　敏¹　陈钧强¹　张　幸¹　叶景佳³　曹　江²

¹浙江省医学科学院, 杭州 310013; ²浙江大学邵逸夫临床医学研究所, 杭州 310016;³浙江大学医学院附属第二医院临床实验研究中心, 杭州 310009

摘要 : 为了探讨人巨细胞病毒(CMV)早期转录增强子用于癌胚抗原(CEA)阳性肿瘤的靶向基因治疗的意义，我们参考有关文献利用PCR 法分别克隆了369 bp 的人CEA 启动子和531 bp 的CMV 早期转录增强子，构建了相应的pGL4.10 荧光素酶报告基因载体，与内参照pGL4.74 质粒共转染CEA阳性的人肠癌细胞LoVo、HT-29、SW620、肺癌细胞A549、乳腺癌细胞MCF7 和CEA阴性的肠癌细胞SW480、宫颈癌细胞HeLa、人肺成纤维细胞LL47，利用双荧光素酶检测系统检测分析了这些细胞中CEA重组启动子的效率。结果表明， CMV增强子能够明显增强CEA启动子在CEA阳性细胞中的效率(提高7.46 至70.16 倍)，但是也能提高CEA启动子在CEA阴性细胞中的效率(提高24.01 至76.40 倍)。因此上述CMV 增强子虽然可以大大提高CEA启动子的效率，但是对特异性有影响，在将其用于CEA阳性肿瘤基因治疗时还需采用其它保证特异性的手段。