Nephrin 分子细胞内吞转运途径的研究

摘要 : 为研究nephrin分子在细胞内的转运途径， 探讨其在维持肾小球裂孔膜完整性上的作用， 构建了nephrin 真核表达载体， 并转染至COS-7 细胞内， 应用免疫荧光三重标记的方法，分别进行细胞内及细胞表面的荧光标记， 联合笼型蛋白介导的内吞(clathrin-mediated endocytosis， CME)和脂筏介导的内吞(raft-mediated endocytosis， RME)标记物，通过共聚焦显微镜对裂隙膜分子nephrin在不同时间点细胞内的内吞转运特点进行研究。结果发现在转运启动2 min 时， 68.44%±4.65% 的nephrin 通过CME 途径进行细胞内转运; 在20 min 时， 65.24%±4.02% 的nephrin 以RME 途径进行转运， 并且两种转运途径均可被相关途径抑制物所阻断。表明nephrin通过两种途径进行细胞内转运， 提示不同的转运途径可能与其实现不同功能有关。