SARS冠状病毒蛋白酶3CLpro N-finger多肽是酶活性所必需
张笋华1,2* 姬明放3 邵晓霞2
1华东师范大学生命科学学院生物系，上海200062；2同济大学蛋白质研究所，上海200092；3神隆(昆山)生化科技有限公司，昆山215300
摘要 : 构建了SARS冠状病毒主要蛋白酶3CLpro及其缺失N端七肽即N-finger的突变体3CL pro(Δ1-7)融合表达质粒，并于大肠杆菌表达系统中表达。得到的融合蛋白经肠激酶酶切，亲和层析，最终得到纯化的3CL pro及其突变体3CLpro(Δ1-7 )。酶活性实验显示，去除N-finger多肽的突变体3CL pro(Δ1-7)丧失了3CLpro所具有的对含有其自动水解位点的荧光底物的水解活性，表明处于非酶活性中心的N-finger多肽是酶活性所必需的。利用固相合成法，进一步合成了N-finger七肽。酶抑制实验表明N-finger七肽表现了对3CL pro部分竞争抑制活性。
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