SV40 TAg转基因小鼠模型的建立及其表达

摘要 : 为了建立中枢神经系统肿瘤小鼠模型，构建了大鼠神经元特异性烯醇化酶(rat neuron-specific enolase， NSE)基因启动子调控下的猿猴病毒40大T抗原基因(simian virus 40 large T antigen gene， SV40 TAg)转基因载体，通过受精卵雄原核显微注射的方法制备转基因小鼠。PCR鉴定转基因小鼠的基因型；RT-PCR和Northern印迹检测转基因阳性鼠中SV40 TAg RNA水平的表达及其组织特异性；免疫组化检测其蛋白质水平的表达。经显微注射共获得9只首代转基因阳性鼠(首建者，Founder小鼠)，其中2例出生时即发生神经干细胞来源的肿瘤，其他Founder小鼠经繁育后共建立了5个SV40 TAg转基因小鼠系，其中有4个系检测到SV40 TAg RNA水平的表达且特异性地表达于脑组织，但未检测到蛋白质水平的表达。研究表明NSE启动子活性具有较强的组织特异性，并起始于小鼠胚胎发育期；SV40 TAg具有明显的致癌作用，且SV40 TAg诱发的神经系统肿瘤易造成转基因小鼠早期死亡。