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以CB-F83-Oligo(dT)-纤维素批量亲和层析分离poly(A)RNA


孙慧斌, 宋秋宝
摘要 : Poly(A)RNA分离是反向转录cDNA,构建cDNA文库以及进行差异杂交等的基础工作,也是改善RNA凝胶吸Ep和S_1核酸酶保护实验质量的基本措施。Poly(A)RNA的分离主要采用Oligo(dT)-纤维素柱亲和层析的方法。我们在非洲爪赡卵母细胞及早期胚胎Poly(A)RNA的分离过程中,先后使用了Poly(A)Quick Column(Stratagene产品)和 Oligo(dT)Cellulose,Type 7(pharmacia产品)柱亲和层析以及CB-F 83-Oligo(dT)-纤维素[3 )( 中国科学院上海细胞生物学研究所,
    苏州试剂厂产品) 批量亲和层析( batch affinitychromatography) ,其中以后者的分离效果最
    好。下面先介绍一下CB-F 83 -Ol igo(dT ) -纤维素批量亲和层析分离poly ( A) RNA 的实验方
    法,然后结合我们的体会,简要分析比较它的使用效果。