LeETR1反义基因对番茄的遗传转化

摘要 : 番茄果实中提取总RNA ，根据GeneBank 中LeETR1 序列，设计合成特异性引物，利用RT-PCR 技术克隆了LeETR1 基因3' 端非编码区313 bp 的cDNA ，经酶切图谱和序列分析鉴定无误后，反向插入到植物表达载体pPZP1 11A 中，构建了表达LeETR1 反义即\lA 的双元载体。经农杆菌途径转化番茄品种B1 后，通过PCR 检测从抗卡那霉素再生植株中筛选到13 株阳性植株，Southem blot 杂交确证反义基因已经整合到番茄染色体中。对果实乙烯释放的测定结果表明，转基因番茄乙烯释放高峰的出现比对照果实推迟10 天，番茄红素的合成受到显著抑制，果实不能形成正常的!红色。推测LeETR1 和番茄的成熟有着密切的关系。