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洋葱卵细胞的分离


陈美灵1 于金金1 吴晓琛1 魏冬梅2 田惠桥1*
1厦门大学生命科学学院, 厦门 361005; 2台州学院生命科学学院, 临海 317000
摘要 : 将洋葱的胚珠置于酶液中酶解50~110 min后剥去其珠被, 可清楚地看到珠心中的胚囊轮廓。用解剖针将珠心从中部横切, 然后挤压其珠孔部位, 卵器细胞从胚珠的切口处逸出。再用显微操作仪的玻璃针将卵细胞和两个助细胞分开, 达到分离洋葱卵细胞的目的。酶对分离卵细胞具有重要作用, 在最佳的酶液浓度[0.02%果胶酶Y23、0.08%果胶酶(Serva)、0.05%纤维素酶和0.05%半纤维素酶]下酶解胚珠110 min后, 解剖1 h可从24个胚珠中分离出10个卵细胞(41.67%)。随着胚囊的发育, 两个助细胞的体积出现明显的二形性。洋葱生活卵细胞的分离为开展洋葱离体受精建立了基础, 也为研究洋葱卵器细胞的发育创造了条件。