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小麦高频率分生组织细胞有丝分裂同步化诱导及分裂周期蛋白质组变化分析


王 炼 尹凤英 段 爽 甘 富 王振英* 彭永康*
天津师范大学生命科学学院/ 细胞遗传与分子调控天津市重点实验室 天津300387
摘要 : 利用Hu和APM双阻断法可以提高小麦分生组织细胞有丝分裂同步化频率, 其中前期达20%, 中期达79%, 后- 末期达27%。双向电泳分析结果表明, 小麦分生组织细胞的有丝分裂周期蛋白质呈现出明显周期性变化, 与间期细胞相比前期中呈现出5 个差异蛋白质斑点, 这5 个蛋白质斑点的分子量和等电点分别为37 kDa/pI 6.6、38 kDa/pI 6.8、34 kDa/pI 7.2、38 kDa/pI 7.5 和15 kDa/pI 6.9, 到了中期, 发现有21 kDa/pI 6.3 的蛋白质斑点存在, 而51 kDa/pI 7.3 和23 kDa/pI 6.1 蛋白质斑点消失, 分生组织细胞进入后- 末期分裂期时, 又发现有37 kDa/pI 6.6、51 kDa/pI7.3、23 kDa/pI 6.1、43 kDa/pI 6.6 蛋白质出现, 蛋白质斑点21 kDa/pI 6.3 消失。在整个细胞周期运行中, 蛋白质斑点37 kDa/pI 6.6、51 kDa/pI 7.3、23 kDa/pI 6.1 和21 kDa/pI 6.3 发生了明显的周期性变化,其中有2 个蛋白斑点经质谱鉴定为chromosome segregation protein SMC 和helicase。它们的功能涉及染色体的形成与分离、DNA复制与能量代谢。