保护剂和冻存时间对昆虫细胞系NIAS-MaBr-85冻后活性的影响

摘要 : 本文分别使用3种不同配方的冻存保护液对甘蓝夜蛾(Mamestra brassicae)5龄幼虫脂肪体细胞系NIAS-MaBr-85进行液氮低温冷冻保存， 并在第1、3、9、17、20、28、38个月时检测细胞活力和圆度的变化情况， 以评估不同冷冻保护剂和冻存时间对细胞活性的影响。研究发现， NIAS-MaBr-85细胞的冻后活性随着冻存时间的延长而降低。短期冻存时， 3种冻存保护液对NIAS-MaBr-85的冻后活性影响不明显， 在长期冻存条件下， 以10% DMSO作为冻存保护剂的细胞冻后活力和圆度变化幅度明显小于以10%甘油为保护剂冻存的细胞。使用胎牛血清(FBS)替代培养基进行细胞冻存， 对保持细胞冻后活性稳定的作用十分有限。因此， 10% DMSO是长期冻存NIAS-MaBr-85细胞的优良冻存保护剂。通过对不同冻存时间的细胞活性比较发现， 虽然冻存时间的长短对于细胞冻后活力和圆度变化有显著影响， 但在昆虫细胞的长期低温保存过程中， 冻存保护剂的差异是影响冻后细胞生物学活性的主要因素。