细胞骨架染色中不同固定方法的探讨

张　维　骞爱荣　高　翔　胡丽芳　瓮媛媛　韩　晶　商　澎^*

西北工业大学生命科学院, 西北工业大学特殊环境生物物理学研究所,空间生物实验模拟技术国防重点学科实验室, 西安 710072

摘要 : 探讨不同细胞固定方法对细胞骨架染色的影响，以期发现适合于微丝与微管细胞骨架染色的固定方法。本文分别采用0.5%戊二醛、95%乙醇、4%甲醛及无水冷丙酮等四种固定液对人骨肉瘤细胞MG-63进行固定，然后分别对微丝和微管进行染色、封片，采用激光共聚焦扫描显微镜观察细胞微丝及微管骨架的形态。同时采用图像分析方法对细胞骨架微丝、微管荧光图像进行定量分析。结果表明， 0.5%戊二醛固定的细胞，微丝呈清晰的束状纤维，微管呈有规律的束状纤维; 95%乙醇固定的细胞，微丝纤维连贯性差，微管纤维非常清晰; 4%甲醛固定的细胞，微丝纤维之间比较模糊，微管纤维呈圆弧状，联贯性较差; 无水冷丙酮固定的细胞，微丝明显皱缩，呈模糊状，微管清晰可见，连贯性较好。因此，不同固定液固定的原理不同，要根据实验目的，选择合适的固定方法。