MSCs心肌样细胞分化过程中GCN5募集促分化相关蛋白的筛选

摘要 : 筛选并分析间充质干细胞(mesenchymal stem cells， MSCs)诱导分化为心肌样细胞过程中GCN5招募促分化相关蛋白集合体的组成。免疫荧光细胞化学、实时荧光定量PCR鉴定MSCs经5-氮杂胞苷(5-azacytidine， 5-azaC)诱导分化为心肌样细胞; 免疫共沉淀技术分离、串联质谱鉴定GCN5募集蛋白集合体组成， 并从心肌细胞分化角度筛选、验证分化相关蛋白因子。MSCs经5-azaC诱导分化的心肌样细胞表达心肌特异性基因GATA4、MEF2C和心肌细胞结构、功能蛋白cTnt、MHC和Cx43; 筛选、验证出心肌细胞分化相关GCN5招募蛋白归类为: (1) DNA结合蛋白Sp1/KLF; (2)转录辅激活子PGC-1a和Rb1; (3)转录延伸复合体组成成分以及信号通路蛋白Akt。通过筛选获得MSCs经诱导向心肌样细胞分化过程中心肌分化相关蛋白因子， 为进一步研究干细胞分化信号传导途径、特异性生物靶点干预以及提高干细胞分化效率打下了基础。