成人食管上皮细胞的原代培养方法

摘要 : 探讨一种简便实用、成本低、纯度高并且成熟稳定的成人食管上皮原代培养的方法。成人食管上皮细胞来源于食管癌患者手术切除食管的正常黏膜上皮。采用组织块法， 分别在DMEM/F12混合培养基和1640培养基中培养成人正常食管上皮细胞。通过直接观察、细胞形态学观察和免疫细胞化学方法观察细胞的生长情况、细胞形态学特征及鉴定所得到的细胞。结果表明， 与1640培养基相比， 应用DMEM/F12混合培养基具有明显的优越性。正常食管上皮细胞在DMEM/F12混合培养基中生长较好， 细胞融合快， 成纤维细胞污染少， 可以生长成为典型的“铺路石”样， 可连续培养21天， 组织块最多可以被迁移4次， 且细胞生长状态良好。免疫细胞化学染色鉴定证实95%的细胞具有广谱细胞角蛋白， 即确定是食管上皮来源的细胞。本研究应用改良的组织块法培养的正常食管上皮细胞纯度高、产量较大， 可以满足正常食管上皮细胞恶性转化方面的研究工作， 而且方法简便易行、成熟稳定， 是一种适合推广应用的正常食管上皮细胞培养方法。