肌萎缩侧索硬化脊髓器官型培养模型的建立

刘卫刚　王晓娟¹　肖向建²　马　征　宋学琴　王丽琴　李春岩^*

河北医科大学第二医院神经内科，石家庄 050000；¹北京同仁医院神经科，北京100730；²河北省人民医院神经科，石家庄050000

摘要 : 利用谷氨酸转运体抑制剂苏-羟天冬氨酸(THA) 制备选择性运动神经元凋亡的肌萎缩侧索硬化(ALS)脊髓器官型培养模型。取出生后 8天乳鼠腰段脊髓组织切成脊髓薄片，在培养液中分别加入不同浓度 THA，用SMI-32免疫组化染色对脊髓腹角α运动神经元进行鉴定， calretinin免疫组化染色对背角中间神经元进行鉴定，测定培养液中谷氨酸 (Glu)、乳酸脱氢酶(LDH)的含量，并与对照组比较。结果显示对照组 a运动神经元数目恒定；THA引起培养液中剂量依赖性Glu、 LDH含量增高和SMI-32阳性的a运动神经元数目减少，脊髓背角的中间神经元损伤相对较轻； 100 mmol/L THA组在体外培养4周后，细胞外Glu含量增高，SMI-32阳性的a运动神经元数目较对照组明显减少，背角的中间神经元数目无显著变化，可以制成 ALS脊髓器官型培养模型。